今天，我们非常高兴地向大家介绍一些实用的小提示，帮助您更高效地使用我们的多重免疫荧光试剂盒。

一、取材送检注意事项

1、细胞爬片

细胞爬片送样前，先用4%多聚甲醛固定15min，然后加入占孔体积的2/3PBS，注意PBS需要覆盖样本，4℃运输和保存。

2、石蜡切片

样本离体后将样本放于口径大于样本直径的管中，组织固定液必须高于组织表面，多于组织体积4-10倍。样本离体0.5h内必须放入固定液固定，通常在标本充分固定12-24h侯进行取材，常温保存和运输。

3、冰冻切片 

固定组织的冰冻切片，常温运输（如果夏天太热可以在运输时垫少量冰袋）；

新鲜组织的冰冻切片干冰运输和-20℃保存；

如您的冰冻样本需要做自发荧光，请进行避光处理，用锡箔纸包裹或其他避光方式。

二、抗体选择注意事项

1、细胞爬片

如您样本是细胞爬片，应选择适用于ICC/IF的一抗。

2、石蜡切片、冰冻切片

如您样本是石蜡切片或冰冻切片，应选择适用于IHC的一抗。

三、实验注意事项

1、细胞爬片

细胞爬片固定10-30min，用PBS溶液洗5min，重复3次，滴加0.3%triton-X100破膜液通透 20min ，PBS 洗 5min ，重复 3 次。

细胞爬片不需要进行抗原修复；细胞爬片需用mIHC专用的抗体洗脱液进行洗脱（配套洗脱液慧蓝生物有售）。

2、冰冻切片

冰冻切片需要使用多聚甲醛固定，10um以上的切片需要滴加0.3%triton-X100破膜液进行破膜：

固定组织需要进行抗原修复，新鲜组织不需要抗原修复。

注意冰冻切片进行抗体洗脱容易掉片，推荐使用抗体洗脱液配合EDTA或柠檬酸水浴修复（配套洗脱液慧蓝生物有售）。

3、石蜡切片

石蜡切片不需要破膜，将组织切片置于EDTA或柠檬酸修复液中进行修复/抗体洗脱（根据不同抗体亲和力灵活调整时间）。

使用慧蓝mIHC试剂盒的细胞爬片、冰冻切片、石蜡切片效果图展示

慧蓝生物助力广大科研客户提供一站式完整多重免疫荧光的整体解决方案。

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