酪酰胺信号放大(TSA ，Tyramide signal amplification)技术是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白进行标记的酶学检测方法，类似常规免疫组化的DAB显色方法，TSA技术同样采用HRP标记的二抗，同样有对应的“显色”步骤（HRP 催化加入反应体系的酪胺荧光素底物，产生活化荧光底物，活化底物可与抗原上的酪氨酸等残基共价结合，使样品上稳定的共价结合酪胺荧光素。之后用热修复法或者抗体洗脱液洗去非共价结合的一抗-二抗-HRP复合物，重复下一种一抗-HRP二抗来第二轮孵育，换另一种酪胺荧光素底物，这样在抗原-抗体结合部位就有大量的荧光素沉积，结果使其检测信号得到 10- 100倍增强，如此往复就可实现多重标记。

应用领域

多重免疫荧光技术广泛应用于以下领域：

肿瘤研究：检测肿瘤微环境中的多种标志物，研究肿瘤异质性和免疫逃逸机制。

神经科学：研究神经元及其网络的结构和功能，分析神经退行性疾病的病理变化。

免疫学：多种免疫细胞标志物的同时检测，研究免疫反应及其调控机制。

心血管研究：分析心肌细胞和血管细胞之间的相互作用，研究心血管疾病的发生和发展机制。

慧蓝生物PLUS系列多重荧光免疫组化试剂盒目前最高可以做到9色，染料搭配详见下表：

PLUS系列试剂盒组分：浓缩型染料、TSA buffer、二抗、DAPI即用型染液、抗体稀释液、3%过氧化氢。

PLUS系列试剂盒优势

灵敏度高，是常规 TSA 试剂盒的 10-50 倍，

注意信号不要过强；信号过强 则降低染料浓度/反应时间/一抗浓度，

信号过低 则提高染料浓度/反应时间/一抗浓度；

PLUS系列试剂盒浓度越高，将成指数倍增强信号；1:50 能获得最强信号，1:500 相当于常规TSA试剂盒的信号。

PLUS系列试剂盒荧光染料抗淬灭性强，全程无需日光灯下避光，使用过程中也无需在暗环境中操作，但不能在太阳光下照射。

PLUS系列试剂盒操作步骤：

慧蓝生物提供的多重免疫荧光整体解决方案通常包括以下几个步骤：

样本准备：组织切片的固定和包埋，确保样本的完整性和荧光信号的保持。

抗体选择和优化：根据目标蛋白的特性选择和优化抗体组合，确保特异性和信号强度。

荧光染色：使用不同荧光染料对抗体进行标记，并进行多重染色实验。

图像采集和处理：使用高分辨率荧光显微镜采集图像，并进行图像拼接和背景校正。

数据分析：利用专用软件对荧光信号进行定量分析，生成可视化数据和报告。

热卖试剂盒清单：

慧蓝生物其他检测试剂盒：

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