产品名称 |
普通切片-五标六色免疫荧光 |
服务介绍 |
检测原理:
酪酰胺信号放大(TSA ,Tyramide signal amplification)技术是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶 蛋白进行标记的酶学检测方法,类似常规免疫组化的 DAB 显色方法 ,TSA 技术同样采用 HRP 标记的二 抗,同样有对应的“显色 ”步骤(HRP 催化加入反应体系的酪胺荧光素底物,产生活化荧光底物,活化底 物可与抗原上的酪氨酸等残基共价结合,使样品上稳定的共价结合酪胺荧光素。之后用热修复法或者抗体 洗脱液洗去非共价结合的一抗-二抗-HRP 复合物,重复下一种一抗-hrp 二抗来第二轮孵育,换另一种酪胺荧 光素底物,如此往复就可实现多重标记。 |
送样运输要求 |
送样运输要求:
1、石蜡切片
样本离体后将样本放于口径大于样本直径的管中,组织固定液(推荐使用货号RCF-02)必须高于组织表面,多于组织体积4-10倍。样本离体0.5h内必须放入固定液固定,通常在标本充分固定12-24h侯进行取材,常温保存和运输。
2、冰冻切片
固定组织的冰冻切片,常温运输(如果夏天温度太高可以在运输时垫少量冰袋);
新鲜组织的冰冻切片干冰运输和-20℃保存;如您的冰冻样本需要做自发荧光,请进行避光处理,用锡箔纸包裹或其他避光方式。
3、细胞爬片
细胞爬片送样前,先用4%多聚甲醛固定15min,然后加入占孔体积的2/3PBS,注意PBS需要覆盖样本,4℃运输和保存。
4、荧光四标以上只能做石蜡包埋切片,不能做冰冻切片和细胞爬片。
一抗选择注意事项:
1、如样本是石蜡切片或冰冻切片,应选择适用于IHC的一抗;
2、如样本是细胞爬片,应选择适用于ICC/IF的一抗。 |
实验流程 |
简要流程:(详细操作步骤请参见技术文档——多重免疫荧光实验流程)
 以下是使用慧蓝生物多重荧光染色Plus试剂盒成像示例:
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注意事项 |
一抗选择注意事项:
1、如样本是石蜡切片或冰冻切片,应选择适用于IHC的一抗;
2、如样本是细胞爬片,应选择适用于ICC/IF的一抗。 |