原理介绍:EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine),中文名为5-乙炔基-2' -脱氧尿苷,是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够替代胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷,thymidine) 插入正在复制的DNA分子中, EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针(如Azide Alexa Fluor 488等)通过一价铜离子催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Click reaction),从而可以进行高效快速的检测细胞增殖,特别是可以有效地检测处于S期的细胞百分数。
与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比, EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。
试剂盒组成
货号
Code
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品名
Product name
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储存条件
Storage condition
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RCF043-1
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PB 10mL
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-20℃
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RCF043-2
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AC 1mL*2
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-20℃
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RCF043-3
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CU 400μL
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-20℃
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RCF043-4
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488色原50μL
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-20℃
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RCF043-5
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100mg/mL EdU母液 100μL
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-20℃
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备注:AC容易氧化失效,不使用时放入冰箱-20度保存,如发现变色,需更换新鲜试剂。
参考结果图:

以上是50mg/kg标记小鼠6小时的染色图像